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在蛋白制備的過程中，我們常常會利用一些方法來判斷蛋白的性能，比如SPR(分子間相互作用力分析)，就能夠很好地為之后蛋白制備提供數(shù)據(jù)支持。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，各種各樣的方法也營運(yùn)而生。今天，普健生物就在這里和大家盤點(diǎn)常用的幾種蛋白互作技術(shù)及其優(yōu)缺點(diǎn)。
1、免疫共沉淀技術(shù)
免疫共沉淀(Co-lmmunoprecipitation,COIP)技術(shù)其實(shí)就是利用抗原與抗體之間的特異性結(jié)合原理而成。主要是通過在細(xì)胞裂解液之中添加特異性抗體，而后再通過靜置等一系列的手段讓其沉淀。而后再通過質(zhì)譜法來檢測抗原的結(jié)合蛋白成員;
免疫共沉淀技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是其過程更加符合體內(nèi)真是生理情況，而且實(shí)驗(yàn)條件溫和，不會出現(xiàn)人為影響的情況;缺點(diǎn)也非常明顯，對于那些結(jié)合力弱或者會瞬間結(jié)合的蛋白來說，研究起來就相對困難一些;
2、Pull Down技術(shù)
Pull Down技術(shù)則是通過先谷底固化或已經(jīng)標(biāo)記過的蛋白或標(biāo)簽蛋白從裂解液中特異性結(jié)合出其中的蛋白的方式。這個(gè)方式也是利用分子間相互作用的方式，但是和COIP技術(shù)不同，它需要先把誘導(dǎo)蛋白純化出來后，才能與目的蛋白溶液進(jìn)行孵化，無法自行模擬細(xì)胞內(nèi)的天然環(huán)境;
3、雙分子熒光互補(bǔ)技術(shù)
雙分子熒光互補(bǔ)技術(shù)其實(shí)就是通過熒光蛋白多肽鏈上進(jìn)行操作，在其末端新增兩個(gè)多肽片段，然后將其分別連接到能發(fā)生作用的目標(biāo)蛋白上。以為你目標(biāo)蛋白發(fā)生反應(yīng)，且含有熒光蛋白，就能夠讓其產(chǎn)生熒光。這個(gè)技術(shù)最大的優(yōu)點(diǎn)就是讓其實(shí)現(xiàn)了可視化，不過操作相對要復(fù)雜一些;
4、酵母雙雜交技術(shù)
酵母雙雜交技術(shù)可以說是現(xiàn)階段使用最為廣泛的一項(xiàng)技術(shù)了，也是現(xiàn)階段最重要的方法之一。其通過將靶蛋白和誘餌蛋白特異性結(jié)合后，因?yàn)檎T導(dǎo)蛋白結(jié)合了基因的啟動子，將其置于酵母細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，如果能檢測到基因表達(dá)的產(chǎn)物則說明雙方有相互作用，反之則表示沒有。這個(gè)方法成本低、檢驗(yàn)結(jié)果迅速，操作簡單;
當(dāng)然了，在蛋白研究的過程中不可能僅僅就這幾種方法，還有噬菌體展示技術(shù)、等離子共振技術(shù)、抗體蛋白陣列技術(shù)等等，我們就不在這里一一詳述了。相對來說，后面提出的這些方面在技術(shù)和成本上有著更高的需求，需要具備一定實(shí)力的企業(yè)才能展示，我們在后面再和大家詳細(xì)描述。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白抗體制備和定制服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。
