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在之前的一次實(shí)驗(yàn)中，不知道因?yàn)槭裁丛颍瑢?dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果完全達(dá)不到預(yù)期。后來(lái)通過(guò)檢測(cè)才發(fā)現(xiàn)是因?yàn)?strong>蛋白純化不夠，雜質(zhì)太多以及蛋白濃度不夠，最終導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為什么做過(guò)蛋白純化，純度還達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
1、在蛋白純化之前，我們需要對(duì)其進(jìn)行相應(yīng)的測(cè)試，當(dāng)然了，在進(jìn)行測(cè)試之前，需要對(duì)蛋白的相關(guān)屬性進(jìn)行了解。比如蛋白的性質(zhì)、敏感性、溶解度、PH敏感已經(jīng)環(huán)境需求等;
2、蛋白的用途了解。一般來(lái)說(shuō)，如果大量級(jí)的蛋白制備需求，則需要考慮到層析柱的尺寸問(wèn)題，以及所得蛋白濃度問(wèn)題，是否需要保持活性等等，只有這些方面都了解了，才能更好地制備蛋白;
3、蛋白的檢測(cè)。不同的方法檢測(cè)出的蛋白性質(zhì)是有一定差別的。比如不同組分的蛋白溶液，需要結(jié)合其靈敏度、精密性、準(zhǔn)確度等方面來(lái)綜合考慮純化的步驟，所以，選擇的檢測(cè)方法也需要有所針對(duì)性才行;
4、緩沖物。為了提高蛋白的穩(wěn)定性、減少微生物生長(zhǎng)、降低冰點(diǎn)或保持蛋白活性等需求，我們需要添加各種添加劑，比如蛋白酶抑制劑、防腐劑、還原劑等等。這個(gè)就需要結(jié)合蛋白的需求來(lái)考慮添加那種緩沖物;
5、存儲(chǔ)條件。在保持活性的前提下，選擇合適的溫度、合適的PH值、是否冰凍、容器儲(chǔ)存等操作;
總的來(lái)說(shuō)，蛋白純化前，我們需要對(duì)蛋白的相關(guān)性質(zhì)進(jìn)行了解，有針對(duì)性地選擇純化方式，過(guò)程中需要對(duì)其進(jìn)行相關(guān)性質(zhì)檢測(cè)，以保證其能達(dá)到我們的需求;純化完成后，需要結(jié)合特性對(duì)其進(jìn)行保存，以保證其活性的同時(shí)增長(zhǎng)其保存時(shí)間。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。
