什么是內(nèi)參抗體?如何挑選合適的內(nèi)參抗體?

　　抗體因?yàn)殡S著使用需求的不同，也發(fā)展出了很多不同的類型，比如內(nèi)參抗體、標(biāo)簽抗體。這些抗體針對不同的使用需求，有著不同的特性和使用方法，所以，選擇合適的抗體，也是我們?nèi)粘９ぷ髦蟹浅Ｖ匾囊画h(huán)。那么，什么是內(nèi)參抗體呢?它的作用又有哪些呢?且看普健生物和您一一講述。

　　什么是內(nèi)參抗體?

　　所謂的內(nèi)參抗體，我們可以從字面上來解釋，就是內(nèi)部參照抗體，它和目的抗體沒有直接聯(lián)系，而是一種精準(zhǔn)制備抗體的輔助抗體。

　　比如我們需要對不同條件或不同組織細(xì)胞中表達(dá)的目的蛋白的相對多少進(jìn)行比較，那么就需要有相同的定量，這樣才會具備比較的基礎(chǔ)。但是在實(shí)驗(yàn)中，可能會因?yàn)榈鞍诐舛炔惶珳?zhǔn)，或者在上樣蛋白的時(shí)候，因?yàn)椴僮鞫a(chǎn)生偏差，這個時(shí)候，就需要有一款內(nèi)部參照抗體來進(jìn)行校正作用。這類抗體需要在冉細(xì)胞或組織間具備恒定的表達(dá)特性，而且表達(dá)量要高。這類抗體，我們稱之為內(nèi)參抗體。

　　如何挑選合適的內(nèi)參抗體呢?

　　對于內(nèi)參抗體的挑選需要注意到很多細(xì)節(jié)方面的問題，通常我們可以結(jié)合如下四點(diǎn)進(jìn)行挑選：

　　1、根據(jù)樣本來源挑選。針對哺乳動物的組織細(xì)胞樣本，我們可以從GAPDH、COX4等產(chǎn)品中進(jìn)行挑選，其他來源的樣本，則需要結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)挑選;

　　2、根據(jù)分子大小挑選。針對分子量的不同，我們需要結(jié)合分子大小來挑選合適的內(nèi)參抗體。在WB實(shí)驗(yàn)中，我們一般選擇大小差異5kDa以上，也就是說不要選擇分子量太過接近的，否則不利于后期的條帶分析;

　　3、結(jié)合表達(dá)位置挑選。一般的蛋白檢測可以考慮選擇那些常用的內(nèi)參抗體(比如：β-actin、GAPDH抗體等)。當(dāng)然了，針對哪些核蛋白很定的，我們可以考慮結(jié)合文獻(xiàn)來進(jìn)行選擇;

　　4、根據(jù)表達(dá)恒定性挑選。挑選的抗體需要看其是否會受到條件變化的影響，比如溫度、PH值、濃度等方面的影響，這個很重要。比如，GAPDH常常用來作為內(nèi)參抗體，到那時(shí)在進(jìn)行代謝研究的時(shí)候，就不適用;

　　總的來說，內(nèi)參抗體的選擇并沒有想象中的復(fù)雜，需要結(jié)合使用需求，選擇合適的。當(dāng)實(shí)在不知道如何選擇的時(shí)候，我們可以結(jié)合相應(yīng)的文獻(xiàn)來進(jìn)行挑選，一般來說，都能夠選擇到合適的抗體產(chǎn)品。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)的抗體制備和定制服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。