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準(zhǔn)確的疾病診斷是指導(dǎo)臨床治療的關(guān)鍵步驟，納米抗體成像技術(shù)及疾病診斷研究需要較高的準(zhǔn)確度和靈敏度，不斷地應(yīng)用創(chuàng)新使得納米抗體（nanobody， Nb）成為疾病診斷的理想選擇。
VH、VHH結(jié)構(gòu)示意圖
納米抗體（nanobody， Nb）抗原結(jié)合區(qū)由單個域組成，分子量小，組織滲透性高，可快速、均勻擴散，利于其穿透致密組織發(fā)揮作用，為各類疾病提供新的治療方法。納米抗體（nanobody， Nb）的VHH域與傳統(tǒng)抗體的重鏈可變區(qū)(variable region of the heavy chain of conventional antibodies, VH) 域有較高的同源性，同人源抗體VH相比，VHH有較長的互補決定區(qū)(complementarity determining region 1, CDR1) 和CDR3區(qū)，伸長的CDR3環(huán)為納米抗體的多種研究提供了可能，且與傳統(tǒng)抗體的VH結(jié)構(gòu)域相比，納米抗體（nanobody， Nb）的框架區(qū)(framework region, FR) 內(nèi)維持VH/VL相互作用的疏水氨基酸突變?yōu)橛H水氨基酸，提高了溶解性和穩(wěn)定性，因此通過設(shè)計可實現(xiàn)人源化改造；納米抗體（nanobody， Nb）在惡劣環(huán)境如極端溫度和pH條件下表現(xiàn)出優(yōu)異的耐受性，更易于儲存和運輸；納米抗體（nanobody， Nb）目前已經(jīng)容易大規(guī)模、低成本地在多種系統(tǒng)中表達(dá)，具備易篩選和純化、相對較低的生產(chǎn)成本等優(yōu)點，在大腸桿菌和酵母或哺乳動物細(xì)胞中目前已可高水平表達(dá)。目前除了單價納米抗體，人們致力于雙價VHH、雙特異性VHH、多價VHH以及融合VHH的研究，來增強其對目標(biāo)的特異性以及功能性等特性，即有利于藥物發(fā)揮其高效作用。
基于納米抗體（nanobody， Nb）以上優(yōu)勢，可用放射性核素、熒光探針、酶示蹤劑、生物素或不同的藥物等分子進(jìn)行納米抗體（nanobody， Nb）標(biāo)記，與分子成像技術(shù)相結(jié)合從而優(yōu)化成像系統(tǒng)，因此納米抗體（nanobody， Nb）作為良好的示蹤劑，成為了體外和體內(nèi)成像的理想選擇。
正電子發(fā)射斷層掃描(positron emission computed tomography, PET) 和單光子發(fā)射計算機化斷層顯像(single-photon emission computed tomography, SPECT)[49-50]中，可分別用正電子發(fā)射核素(如18F、68Ga或89Zr) 和γ-發(fā)射核素(如99mTc等) 標(biāo)記納米抗體（nanobody， Nb）進(jìn)行成像；在超聲成像中，可使用納米抗體（nanobody， Nb）提高造影劑(如微泡和納米泡) 的穿透力強及信號，主要用于可視化血管系統(tǒng)；特別是在腫瘤診斷領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，檢測癌細(xì)胞本身、生物標(biāo)志物、可視化與癌細(xì)胞周圍環(huán)境密切相關(guān)的成分成為診斷和監(jiān)測的有效策略。
有研究表明在原位臨床前模型中，抗HER2的納米抗體（nanobody， Nb） 2Rs15d成功地檢測到HER2陽性的腦病變，除此之外，表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor, EGFR)、前列腺特異性膜抗原(prostate specific membrane antigen, PSMA)、CD20和CD38等也被作為癌細(xì)胞成像的目標(biāo)抗原展開研究；巨噬細(xì)胞被認(rèn)為是許多免疫療法失敗的元兇，巨噬細(xì)胞甘露糖受體蛋白(MMR, CD206) 在促腫瘤的巨噬細(xì)胞上高度表達(dá)，99mTc標(biāo)記的抗MMR Nbs可用于SPECT/CT對小鼠乳腺癌和肺腺癌的可視化；抗血管細(xì)胞粘附分子-1 (vasculature cell adhesion molecule-1, VCAM-1) 的納米抗體（nanobody， Nb）已被用于標(biāo)記微泡，并應(yīng)用于腫瘤血管的可視化超聲成像，對小鼠注射10 min后腫瘤內(nèi)可見超聲造影信號持續(xù)，且信號明顯高于對照。
此外，還用于炎癥性疾病及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等疾病的成像，為了以高靈敏度監(jiān)測動脈粥樣硬化病變，Bridoux等使用了一種基于納米抗體（nanobody， Nb）的示蹤劑(cAbVCAM1-5) 靶向血管細(xì)胞粘附分子-1 (VCAM-1)，將RESCA螯合劑偶聯(lián)到cAbVCAM1-5 Nb上，并用[18F]AlF進(jìn)行標(biāo)記，通過PET/CT可視化載脂蛋白e基因缺陷小鼠動脈粥樣硬化斑塊。對于光學(xué)成像，納米抗體（nanobody， Nb）被熒光染料標(biāo)記，并通過非侵入性的體內(nèi)成像方式、體內(nèi)顯微鏡和體外流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。
在結(jié)直腸癌(colorectal cancer, CRC) 早期初篩以及輔助診斷方面，納米抗體（nanobody， Nb）作為親和試劑來開發(fā)糞便免疫化學(xué)檢測(fecal immunochemical tests, FITs) 用于檢測人類糞便樣品中的血紅蛋白(hHg) 顯示出優(yōu)異的再現(xiàn)性和精確度，可作為早期結(jié)直腸癌的大規(guī)模群體篩查工具，這克服了結(jié)腸鏡檢查前的飲食限制及檢查時的侵入性，提高了患者的可接受度。
納米抗體（nanobody， Nb）應(yīng)用于疾病診斷的技術(shù)有助于我們探究疾病的發(fā)生過程及了解發(fā)病機制，在早期捕獲較高的病變信號，進(jìn)行無損傷實時成像，方便疾病的預(yù)后觀察，在內(nèi)窺鏡檢查過程中或在熒光引導(dǎo)的手術(shù)背景下用于可視化表面病變。
納米抗體主要通過免疫羊駝由羊駝體內(nèi)自身的抗體成熟階段來得到抗體基因，然后通過噬菌體展示篩選技術(shù)來從羊駝抗體庫中篩選得到最適合的抗體序列。
我們擁有自建養(yǎng)殖基地，每年近百頭成年羊駝用于免疫，穩(wěn)定提供大量的免疫抗原。擁有近千億級別天然庫，最快在2周內(nèi)可完成針對各類靶點的特異性納米抗體快速篩選，抗體親和力可達(dá)10-9M 級別，插入正確率100%，序列正確率97%，隨機選取200個克隆測序，均無重復(fù)序列；并且免疫庫源自百余只不同種類的駝類樣本-羊駝（Alpaca ）、駱駝（Camel）、美洲駝（Llama），提供更高抗體多樣性以構(gòu)建免疫庫，獲得更高親和力VHH序列。）
