盤點(diǎn)雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備單克隆抗體會(huì)遇到的問題

　　雜交瘤細(xì)胞制備抗體技術(shù)相信大家都不覺得陌生了，它就是一種將免疫后的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后產(chǎn)生單克隆抗體的傳統(tǒng)方法。如果想了解雜交瘤相關(guān)的具體知識(shí)，可以點(diǎn)擊“什么是雜交瘤測(cè)序?它的操作流程是怎樣的?”查看。今天，普健生物在這里簡(jiǎn)單和大家介紹一下有關(guān)雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)常見的一些問題。

　　一、微生物污染

　　1、細(xì)菌和真菌污染一般都是因?yàn)椴僮鞑划?dāng)所導(dǎo)致，除了實(shí)驗(yàn)之前做好日常消殺外，還需要確保消毒劑的純度及質(zhì)量;

　　2、支原體污染則可能是因?yàn)檠逯破芬约跋嚓P(guān)實(shí)驗(yàn)材料污染所導(dǎo)致，一般來說，短期污染沒什么明顯變化，但是時(shí)間長(zhǎng)了之后可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢。所以，在購(gòu)買相關(guān)產(chǎn)品的時(shí)候，要盡量保證相關(guān)產(chǎn)品的純度，減少不必要的麻煩;

　　3、原聲生物污染常見的主要為黑膠蟲，污染后會(huì)出現(xiàn)一些小黑點(diǎn);

　　二、細(xì)胞不生長(zhǎng)

　　1、最常見的原因是因?yàn)槿诤显噭┯卸荆枰M(jìn)行替換;

　　2、使用的血清質(zhì)量很差，可以優(yōu)先考慮胎牛血清;

　　3、添加劑比例不正常;

　　三、細(xì)胞不分泌抗體

　　1、細(xì)胞直接不分泌抗體一般來說主要是因?yàn)榭乖庖咝圆钏鶎?dǎo)致，脾臟損傷嚴(yán)重等;

　　2、后期分泌抗體越來越少主要因?yàn)楣撬枇龇敝潮灰种啤⒖寺〔患皶r(shí)以及染色體丟失等情況導(dǎo)致;

　　四、細(xì)胞克隆困難

　　1、對(duì)已有雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選;

　　2、在培養(yǎng)基中加入IL-6;

　　其實(shí)大家不難看出，導(dǎo)致雜交瘤細(xì)胞制備抗體困難或失敗的原因主要是因?yàn)榧?xì)節(jié)方面的錯(cuò)誤操作導(dǎo)致。所以，我們?cè)谌粘？贵w制備時(shí)，不僅要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)流程來，而且需要注意各個(gè)細(xì)節(jié)方面的問題。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤制備單克隆抗體服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。