穩(wěn)定細胞株構建時如何提升細胞轉(zhuǎn)染效率?

　　在進行穩(wěn)定細胞株構建時，為了將目的蛋白基因載入到宿主細胞中，我們都會選擇通過轉(zhuǎn)染的方式來實現(xiàn)?？梢哉f，轉(zhuǎn)染的成功與否，直接關系到目的蛋白表達的結果。那么，我們在進行穩(wěn)定細胞株細胞轉(zhuǎn)染時，有沒有什么辦法提升其轉(zhuǎn)染效率，起到事半功倍的效果呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　我們知道，常用的細胞轉(zhuǎn)染方法主要有三種，分別是生物轉(zhuǎn)染、物理轉(zhuǎn)染以及化學轉(zhuǎn)染。

　　生物轉(zhuǎn)染：其實就是通過病毒感染的方式，將目標蛋白DNA整合到宿主細胞中去;

　　物理轉(zhuǎn)染：通過電穿孔、細胞注射等方法，直接將目的蛋白DNA注入到宿主細胞中去(不過容易造成細胞死亡);

　　化學轉(zhuǎn)染：利用陽離子與陰離子核酸結合的特性，使得兩者相互吸引，從而實現(xiàn)轉(zhuǎn)染;

　　從上面的描述我們不難看出，對于不同的轉(zhuǎn)染方法，其有著不同的優(yōu)勢和劣勢，其轉(zhuǎn)染效率主要和如下幾個方面有關：

　　1、細胞活力。轉(zhuǎn)染成功率和細胞活性有著極大的關系，自然是活力越強，轉(zhuǎn)染的成功率就越高，而且和細胞類型也有著一定的關系;

　　2、細胞融合度。融合度越高，能夠在一定程度上提升細胞轉(zhuǎn)染的接受程度;

　　3、核酸類型。簡單核酸類型轉(zhuǎn)染成功率更高，反之越是復雜，成功率相對月低;

　　4、轉(zhuǎn)染方法。對于不同類型的細胞選擇不同類型的轉(zhuǎn)染方法其成功率存在著極大的不同;

　　所以，想要提升穩(wěn)定細胞株細胞轉(zhuǎn)染的目的，我們可以從如下幾個方面入手：

　　1、選擇活性高的細胞。盡量選擇那些細胞活性高的細胞，避免選擇活性低的細胞;

　　2、提升核酸純度。細胞轉(zhuǎn)染時需要保證目的DNA與RNA盡可能同質(zhì)，確保每個步驟不收RNA酶的影響;

　　3、合適的細胞密度。需要控制好細胞密度，過高或過低都會造成轉(zhuǎn)染效率變低;

　　4、選擇合適的轉(zhuǎn)染方法。根據(jù)細胞的類型選擇合適的轉(zhuǎn)染方法，不要一直使用單個轉(zhuǎn)染方法;

　　總的來說，我們在穩(wěn)定細胞株細胞轉(zhuǎn)染時，需要結合細胞類型及其細胞活性來進行方法選擇，在轉(zhuǎn)染過程中需要注意到各類細節(jié)問題，只有這樣，才能更好地保證實驗的成功。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株構建服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。